現(xiàn)在市場上
日本島津色譜柱種類繁多，不同類型的色譜柱分離對象不同，因此，必須學(xué)會精準(zhǔn)選擇液相色譜柱，在選擇色譜柱之前一定的認(rèn)識和了解色譜柱的一些基本知識。今天從分離模式選擇、樣品信息、色譜柱參數(shù)等方面與大家聊一聊如何精準(zhǔn)選擇一款合適的
日本島津色譜柱。
1、分離模式
液相色譜柱種類繁多，在精準(zhǔn)選擇液相色譜柱之前，首先必須選擇HPLC的分離模式，根據(jù)使用的固定相和流動相的組合不同，可以得到下列各種各樣的分離模式。
2、了解樣品
了解待檢樣品的結(jié)構(gòu)、分子量、溶解性、離子化、極性、pH值等物理化學(xué)性質(zhì)，再參照下圖選擇適合的分離模式和精準(zhǔn)的液相色譜柱固定相：
3、色譜柱參數(shù)
色譜柱性能影響因素有很多，例如，硅膠純度、色譜柱尺寸、顆粒形狀、粒徑、表面積、孔徑，化學(xué)性質(zhì)包括鍵合類型、碳覆蓋率、封端，下面依次介紹各參數(shù)對色譜柱性能的影響，并根據(jù)以上參數(shù)精準(zhǔn)地選擇液相色譜柱。
(1)硅膠純度
硅膠純度對強(qiáng)極性化合物的分離最為重要，殘留金屬離子濃度、硅膠的雜質(zhì)會影響化合物的峰形，硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形，易發(fā)生拖尾。
(2)色譜柱尺寸
增加色譜柱長度，可以在一定程度上提高柱效，但也會升高壓力和導(dǎo)致峰展寬；含量測定、溶出檢測等對于分離的要求較低，可選用較短的色譜柱，減少運行時間。內(nèi)徑大，提高載樣量，但也會增加橫向擴(kuò)散，同樣會導(dǎo)致峰展寬。內(nèi)徑小的色譜柱靈敏度較高，峰型更窄，但是載樣量較小。
